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沙门氏菌检测标准:GB 14934-2016
发布时间:2024-10-10
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沙门氏菌检测标准:GB 14934-2016

沙门氏菌(Salmonella)是一种常见的食源性病原菌,广泛存在于动物肠道及其排泄物中,能引起严重的食源性疾病。为确保食品安全,中国政府制定了《食品安全国家标准 沙门氏菌检验方法》(GB 14934-2016)。作为一家生产食品接触产品工厂的老板,我深刻认识到沙门氏菌检测的重要性。本篇文章将详细解读GB 14934-2016标准,并结合实际案例进行深入分析。

一、GB 14934-2016标准概述

1. 标准背景

GB 14934-2016是中国食品安全国家标准,主要用于指导沙门氏菌的检测方法。该标准规定了沙门氏菌检验的样品处理、预富集、选择性富集、分离、确认及结果报告等步骤,确保检测结果的准确性和可靠性。

2. 标准适用范围

该标准适用于食品、食品原料、食品添加剂、食品包装材料及其他相关产品中沙门氏菌的检测。

表1:GB 14934-2016标准基本信息

项目

内容

标准号

GB   14934-2016

标准名称

食品安全国家标准   沙门氏菌检验方法

适用范围

食品、食品原料、食品添加剂、食品包装材料及其他相关产品中沙门氏菌的检测

二、沙门氏菌的生物学特性

1. 沙门氏菌的分类

沙门氏菌属(Salmonella)属于肠杆菌科(Enterobacteriaceae),根据抗原结构可分为多种血清型,常见的致病血清型包括沙门氏菌肠炎亚种(S. Enteritidis)和沙门氏菌伤寒亚种(S. Typhimurium)。

2. 沙门氏菌的生长特性

温度:沙门氏菌适生长温度为37℃,但在5℃至47℃范围内均可生长。

pH值:沙门氏菌适生长pH值为6.5至7.5,但在4.0至9.0范围内均可生长。

水活度:沙门氏菌在水活度大于0.93的环境中生长良好。

表2:沙门氏菌的生物学特性

特性

范围

温度

5℃至47℃,适生长温度为37℃

pH值

4.0至9.0,适生长pH值为6.5至7.5

水活度

大于0.93

三、GB 14934-2016标准检测方法

1. 样品处理

步骤

样品制备:称取一定量的样品,并加入缓冲液进行均质处理,制备样品悬液。

样品稀释:根据需要,对样品悬液进行十倍系列稀释。

表3:样品处理步骤

步骤

具体操作

样品制备

称取一定量样品,加入缓冲液进行均质处理,制备样品悬液

样品稀释

对样品悬液进行十倍系列稀释

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2. 预富集

步骤

培养基:使用缓冲蛋白胨水作为预富集培养基。

培养条件:在37℃下培养18至24小时。

表4:预富集步骤

步骤

具体操作

培养基

使用缓冲蛋白胨水作为预富集培养基

培养条件

在37℃下培养18至24小时

3. 选择性富集

步骤

培养基:使用硒胨胨水和四liuhuang酸盐-胆盐-琼脂(TBG)作为选择性富集培养基。

培养条件:在42℃下培养18至24小时。

表5:选择性富集步骤

步骤

具体操作

培养基

使用硒胨胨水和TBG作为选择性富集培养基

培养条件

在42℃下培养18至24小时

4. 分离和纯化

步骤

分离培养基:使用麦康凯琼脂(MAC)和XYL-赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂(XLD)进行分离培养。

培养条件:在37℃下培养18至24小时。

挑取菌落:挑选可疑菌落进行纯化培养。

表6:分离和纯化步骤

步骤

具体操作

分离培养基

使用MAC和XLD进行分离培养

培养条件

在37℃下培养18至24小时

挑取菌落

挑选可疑菌落进行纯化培养

5. 确认试验

步骤

生化试验:进行糖发酵试验、氧化酶试验、H2S生成试验等。

血清学试验:使用特异性抗体进行血清学分型试验。

表7:确认试验步骤

步骤

具体操作

生化试验

进行糖发酵试验、氧化酶试验、H2S生成试验等

血清学试验

使用特异性抗体进行血清学分型试验

6. 结果判定

根据生化试验和血清学试验结果,判断样品中是否存在沙门氏菌。

表8:结果判定步骤

步骤

具体操作

结果判定

根据生化试验和血清学试验结果,判断样品中是否存在沙门氏菌

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四、检测过程中的注意事项

1. 样品的无菌操作

在样品处理和检测过程中,必须确保无菌操作,避免样品受到外界污染。

2. 培养基的准备和使用

培养基的配制和使用必须严格按照标准操作规程进行,确保其有效性和准确性。

3. 检验设备的校准

检测设备在使用前应进行校准,确保其检测精度和准确性。

表9:检测过程中的注意事项

注意事项

具体操作

样品的无菌操作

确保样品处理和检测过程中无菌操作,避免样品受到外界污染

培养基的准备和使用

严格按照标准操作规程配制和使用培养基,确保其有效性和准确性

检验设备的校准

检测设备在使用前进行校准,确保其检测精度和准确性

五、实际案例分析

案例1:奶粉样品中沙门氏菌检测

背景

某奶粉生产企业进行内部质量控制,需对奶粉样品进行沙门氏菌检测,确保产品安全。

检测步骤

样品处理:称取25g奶粉样品,加入225mL缓冲蛋白胨水,进行均质处理。

预富集:样品悬液在37℃下培养18至24小时。

选择性富集:使用硒胨胨水和TBG,在42℃下培养18至24小时。

分离和纯化:使用MAC和XLD进行分离培养,在37℃下培养18至24小时,并挑选可疑菌落进行纯化。

确认试验:进行糖发酵试验、氧化酶试验、H2S生成试验及血清学分型试验。

结果判定:根据生化试验和血清学试验结果,确认样品中是否存在沙门氏菌。

检测结果

根据检测结果,样品中未检出沙门氏菌,符合国家标准要求。

表10:奶粉样品中沙门氏菌检测结果

检测步骤

具体操作

检测结果

样品处理

称取25g奶粉样品,加入225mL缓冲蛋白胨水,进行均质处理

-

预富集

样品悬液在37℃下培养18至24小时

-

选择性富集

使用硒胨胨水和TBG,在42℃下培养18至24小时

-

分离和纯化

使用MAC和XLD进行分离培养,在37℃下培养18至24小时,并挑选可疑菌落进行纯化

-

确认试验

进行糖发酵试验、氧化酶试验、H2S生成试验及血清学分型试验

-

结果判定

根据生化试验和血清学试验结果,确认样品中是否存在沙门氏菌

未检出沙门氏菌,符合国家标准要求

案例2:鸡肉样品中沙门氏菌检测

背景

某食品加工企业进行原料检验,需对鸡肉样品进行沙门氏菌检测,确保原料安全。

检测步骤

样品处理:称取25g鸡肉样品,加入225mL缓冲蛋白胨水,进行均质处理。

预富集:样品悬液在37℃下培养18至24小时。

选择性富集:使用硒胨胨水和TBG,在42℃下培养18至24小时。

分离和纯化:使用MAC和XLD进行分离培养,在37℃下培养18至24小时,并挑选可疑菌落进行纯化。

确认试验:进行糖发酵试验、氧化酶试验、H2S生成试验及血清学分型试验。

结果判定:根据生化试验和血清学试验结果,确认样品中是否存在沙门氏菌。

检测结果

根据检测结果,样品中检出沙门氏菌,不符合国家标准要求。

表11:鸡肉样品中沙门氏菌检测结果

检测步骤

具体操作

检测结果

样品处理

称取25g鸡肉样品,加入225mL缓冲蛋白胨水,进行均质处理

-

预富集

样品悬液在37℃下培养18至24小时

-

选择性富集

使用硒胨胨水和TBG,在42℃下培养18至24小时

-

分离和纯化

使用MAC和XLD进行分离培养,在37℃下培养18至24小时,并挑选可疑菌落进行纯化

-

确认试验

进行糖发酵试验、氧化酶试验、H2S生成试验及血清学分型试验

-

结果判定

根据生化试验和血清学试验结果,确认样品中是否存在沙门氏菌

检出沙门氏菌,不符合国家标准要求

六、结论

GB 14934-2016标准为沙门氏菌的检测提供了详细的指导,确保检测结果的准确性和可靠性。通过成分分析、预富集、选择性富集、分离和纯化、确认试验及结果判定,可以全面评估食品及相关产品中沙门氏菌的存在情况。作为生产食品接触产品的工厂老板,我将严格按照GB 14934-2016标准进行沙门氏菌检测,确保产品始终符合高的安全和质量标准。同时,我们将不断优化和改进检测方法,提高检测效率和准确性,确保消费者使用的每一件产品都是安全、合规和高质量的。

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